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琼氏不动杆菌的优势及保存方法

  琼氏不动杆菌,非模式菌株,主要用途为研究、教学。烷烃降解,30℃下生长,以十八烷烃为唯一碳源。
  菌种特征特性
  烷烃降解,30℃下生长,以十八烷烃为唯一碳源。革兰氏染色阴性,杆状,静止期呈球形,常成对,也可呈不同长度的链状,无芽孢; 菌落特征:LB培养基上呈圆形,隆起,菌落淡黄,不透明,边缘光滑平整,湿润,30℃下生长良好。
  丁基-3-甲基六氟磷酸盐咪唑啉嗡/1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐/1-丁基-3-甲咪唑六氟磷酸盐/1-丁基-3-甲基六氟磷酸盐咪唑嗡/1-正丁基-3-甲基咪唑鎓六氟磷酸盐/1-丁基-3-甲基六氟磷酸盐咪唑/1-正-丁基-3-甲基咪唑鎓六氟磷酸盐/BMIMPF6。
  产品优势
  产品质量稳定,是为科研和生产提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。
  国内首创封闭管包装,冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法,保证菌种的复苏质量。
  严格的质检程序,确保产品质量的稳定性。
  该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业,疾控中心、质检局、出入境、药检局等等,得到广泛好评。
  上海沪峥产品性价比适中,从销售到售后,给您完善的服务。
  保存方法
  传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于较适生长温度为好。
  悬液保存法:
  蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
  糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
  载体保存法:土壤保存法;砂土保存法;硅胶保存法;磁珠保存法;麸皮保存法;纸片(滤纸)保存法。
  常用的冷冻保存法:
  ①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
  ②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
  ③液氮保存法(-196℃):是适用范围微生物保存法。
  五、实验内容
  称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
  干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
  高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
  过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
  微生物菌种的培养
  孢子制备
  放线菌孢子的制备
  一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
  霉菌孢子的制备
  霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
  种子制备
  ⑴摇瓶种子制备
  摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
  ⑵种子罐种子制备
  种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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